期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
SIGIRR-EGFP真核表达载体构建及在H292细胞中的亚细胞定位研究
张椿；钱桂生；赵云峰；吴学玲
关键词：SIGIRR, 绿色荧光蛋白, 激光共聚焦
摘要：目的 通过增强型绿色荧光蛋向示踪技术,观察SIGIRR(single Ig IL,1R-related molecule)在人气道上皮细胞株H292中的分布特点及对上皮细胞天然免疫功能的影响.方法 构建SIGIRR-EGFP融和蛋白的真核表达载体,运用脂质体转染的方法转染人气道上皮细胞株H292,再利用激光共聚焦显微镜对其进行亚细胞定位研究.经LPS刺激后,ELISA检测转染前 后上皮细胞TNF-α分泌水平的差异.结果 构建的融和蛋白表达载体SIGIRR-EGFP经EooR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,电泳显 示其条带大小为4.7 kh和1.23 kb左右,经测序证实SIGIRR的序列与GenBank公布的人cDNA序列完全一致.激光共聚焦显示pEGFP-N1空载体转染表达的绿色荧光蛋白在H292细胞中均匀分布,而重组载体SIGIRR-ECFP表达的融和蛋白在H292细胞核周(膜)和细胞膜边缘上有连续分布现象.经LPS刺激后,pEGFP-N1转染的细胞和未转染细胞TNF-α水平无显著性差异(P＞0.05),而SIGIRR-EGFP转染细胞与pEGFP-N1转染细胞相比,显著降低了TNF-α的产生(P＜0.01).结论 成功构建了SI-GIRR-EGFP融和蛋白的真核表达载体,并利用绿色荧光蛋白标记的方法显示了SIGIRR分子在H292细胞中细胞膜分布.过表达的SIGIRR降低了上皮细胞IPS诱导的炎症因子TNF-α产生.
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