期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称:免疫学杂志
- 主管单位:第三军医大学
- 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号:1000-8861
- 国内刊号:51-1332/R
- 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
疏水层析法和凝胶过滤法分离HI47抗CD20 F(ab')2之比较
许元生;熊冬生;肖瑛;范冬梅;王金宏;杨纯正
关键词:疏水层析, 凝胶过滤, F(ab')2
摘要:目的比较疏水层析和凝胶过滤两种方法分离纯化HI47抗CD20 F(ab')2的优缺点.方法采用亲和层析柱protein-G对发酵菌体裂解液进行粗纯化,分别采用疏水层析法和凝胶过滤法进行抗CD20 F(ab')2的分离纯化:疏水层析采用梯度洗脱,80%B液洗脱20min,100%B液洗脱30 min;凝胶过滤以50mmol/L PB缓冲液(pH 7.0),0.8 mL/min洗脱4 h.结果粗纯化产物主要含F(ab')2、Fab',含量分别为19.6%、59.7%.采用疏水层析法1 h即可完成分离,F(ab')2回收率为67%,纯度为89.3%;凝胶过滤4 h完成分离,F(ab')2回收率为65%,纯度为90.5%.FACS结果表明,两者结合Raji细胞的阳性率分别为99.93%和99.97%.结论疏水层析分离纯化抗CD20 F(ab')2简单、快速、回收率高、纯度高,适用于大规模的工业化生产.
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