期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

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  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2003年第05期

肿瘤坏死因子新型免疫抑制剂的构建、表达和鉴定

韩苇;赵宁;颜真;石继宏;张英起

关键词:TNF-α, 鸡卵清溶菌酶, T辅助细胞表位序列, 免疫抑制剂
摘要:目的用鸡卵清溶菌酶(Hen egg-white lysozyme,HEL)T辅助细胞表位序列替换hTNF-α3'末端序列,构建和表达hTNF-α新型免疫抑制剂.方法将重组的hTNF-α HEL克隆、表达、纯化后进行初步的生物学活性鉴定.结果DNA测序分析表明,重组的hTNF-α HEL3'末端序列与设计序列完全相同.将其插入pBV220表达载体中,重组菌经42℃诱导4 h做SDS-PAGE分析,结果显示该免疫抑制剂获得了表达,Mr为17 000,其表达量为菌体总蛋白量的30%.Western blot结果证实,该表达蛋白可与抗TNF-α抗体产生免疫反应.对该表达蛋白进行了阴离子交换柱纯化,获得的重组蛋白的纯度可达95%以上.对该蛋白的体外杀伤活性检测表明,该蛋白已完全丧失了TNF-α的体外杀伤活性.结论上述实验结果证明,TNF-α免疫抑制剂的构建获得了成功,该免疫抑制剂既保持了与TNF-α抗体结合的能力又失去了TNF-α的杀伤活性,为其下一步治疗作用的研究奠定了基础.