期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
NK细胞颗粒酶F切割底物Drp1诱导细胞凋亡
张文法；梅丽华；邹发贵；石磊
关键词：NK细胞, 颗粒酶F, Drp1, 线粒体, 细胞凋亡
摘要：目的 前期发现Drp1(Dynamin-related protein 1)可能参与小鼠颗粒酶F(Granzyme F,GzmF)诱导的细胞凋亡通路,本文试图证明Drp1是颗粒酶F新的作用底物,并且参与诱导Bax/Bak非依赖性细胞死亡.方法 表达活性GzmF以及无活性点突变的颗粒酶F(Ser195AlaGzmF,S-AGzmF),通过不同浓度梯度以及不同时间处理全细胞裂解液,Westemblot鉴定颗粒酶F对Drp1的切割情况;模拟生理情况下的Loading条件,通过腺病毒Ad将颗粒酶F转导进入细胞,进一步验证Drp1为颗粒酶F的生理底物;构建Drp1高表达质粒pcDNA-Drp1,在细胞中高表达Drp1,Westemblot验证并通过Ad将颗粒酶F导入此细胞,流式细胞术检测Drp1高表达对凋亡影响情况.结果 颗粒酶F能够在不同浓度和时间切割Drp1,并且产生Mr约60000的切割片段.随着颗粒酶F作用时间和浓度的提高,被切割的Drp1量也依次提高;模拟生理情况下,GzmF/Ad转导进入细胞后,Drp1被切割,证明Drp1是颗粒酶F的生理底物;成功构建Drp1高表达载体,将颗粒酶F导入细胞,流式细胞术检测到Drp1高表达细胞的凋亡明显降低.结论Drp1是颗粒酶F的底物且可能在颗粒酶F诱导细胞凋亡通路中扮演重要角色.
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