期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
葡萄胎病理相关基因F10编码蛋白单克隆抗体的制备与应用
庞战军；周君桂
关键词：新基因F10, F10重组蛋白, 葡萄胎, 单克隆抗体
摘要：目的 构建原核质粒表达葡萄胎相关新基因F10重组蛋白,分离纯化制备其单克隆抗体,并鉴定其生物学特性.方法 用逆转录聚合酶链反应法从成人组织中扩增F10编码序列,将其克隆到pET28a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达F10基因重组蛋白.以纯化后的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体.ELISA法检测杂交瘤细胞分泌F10单克隆抗体的效价和类型,免疫组织化学染色检测F10蛋白在葡萄胎及胎盘组织中的表达,鉴定制备F10单克隆抗体的特异性.结果 成功构建了pET28a/F10原核表达质粒并获得高纯度的重组F10蛋白.筛选出3株能稳定分泌抗F10蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞系,其效价比高达1∶7.2×105,免疫球蛋白类型均为IgG1类.免疫组织化学染色显示该抗体能特异结合葡萄胎及胎盘绒毛组织中的F10蛋白,且葡萄胎组织中F10蛋白的表达显著高于正常胎盘组织.结论 表达及纯化的重组F10蛋白纯度高,免疫原性强.以此为抗原制备的抗F10蛋白的单克隆抗体效价高、特异性强,可用于F10功能的进一步研究.
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