期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称:免疫学杂志
- 主管单位:第三军医大学
- 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号:1000-8861
- 国内刊号:51-1332/R
- 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
人TOP2A单克隆抗体的制备与初步应用
汤璐含;褚伯阳;金坚
关键词:TOP2A, 原核表达, 单克隆抗体
摘要:目的制备抗TOP2A(DNA拓扑异构酶Ⅱ型α)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定.方法应用分子生物学技术构建含人TOP2A编码序列的原核表达载体,表达并纯化人TOP2A蛋白.TOP2A蛋白皮下多点和腹腔注射加强免疫Balb/c小鼠,取脾与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,利用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,采用有限稀释法进行亚克隆,用免疫印迹法、免疫组化染色和流式细胞术对抗体进行特异性鉴定.结果获得了3株能够稳定分泌TOP2A单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1 1G5、3B10和10A3,通过免疫印迹、免疫组化和流式结果验证均为阳性.结论成功制备TOP2A单克隆抗体,为进一步的TOP2A蛋白的表达与肿瘤的关系研究奠定了基础.
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