期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及单克隆抗体制备
吴胜昔；邵烈刚；曾政；陈晶；刘人菊；袁丽萍；熊仲良；蔡家利
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒, 核衣壳蛋白, 单克隆抗体
摘要：目的 获得原核表达的PRRSV N蛋白,并制备N蛋白的单克隆抗体.方法 将已构建的含有PRRSV N蛋白基因的重组表达载体阳性菌,在37℃条件下,用终浓度l mmol/L的IPTG诱导表达4h.经SDS-PAGE分析,表明N基因在大肠杆菌中得到了高效表达.经镍柱亲和层析纯化,以此蛋白作为抗原采用长程免疫法免疫Balb/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合.结果 获得了纯度较高、免疫学活性较好的N蛋白,细胞融合率为81.3％.建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体.初检阳性率为17.3％,经2次亚克隆反复筛选获得了2株分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株,命名为4G10和2F9.ELISA证实所获得的单抗是特异性针对PRRSV共同的抗原表位,4G10和2F9经反复冻存、复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体.结论 成功制备出高效价的抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体,为建立一种快速、特异的PRRSV检测方法奠定了基础.
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