期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
应用dtSCT技术制备低亲和力抗原肽InsB15-23肽的MHCⅠ四聚体
潘兴元；蒋芳芹；梁锴；余鸣鸣；陈则东；窦延；季明春；焦新安
关键词：MHCⅠ四聚体, 二硫键捕获型单链三聚体, CD8+T细胞, 低亲和力抗原肽
摘要：目的 制备低亲和力InsB15-23抗原肽的MHCⅠ四聚体.方法 应用二硫键捕获型单链三聚体(disulfide-trap singlechain trimer,dtSCT)技术,将InsB15-23抗原肽、小鼠β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2m)和H-2Kd分子以柔性接头(linker,L)依次连接,并在抗原肽的C末端与H-2Kd分子间引入了二硫键,以提高抗原肽与H-2Kd分子结合的稳定性.融合基因克隆入pET-22b原核表达载体,经过诱导表达、洗涤包涵体、稀释复性等步骤获得单体,生物素化后制成InsB15-23 dtSCT型四聚体.结果 我们比较了自制InsB15-23 dtSCT四聚体和商品化G9V传统五聚体对小鼠外周血特异性CTLs的检出率.2种多聚体对阴性对照Balb/c小鼠都显示出很低的非特异性标记水平,都能检出4周龄NOD母鼠外周血中低水平的InsB15-23特异性CTLs,且二者的检出率无统计学差异.结论 我们成功制备出稳定的InsB15-23dtSCT型四聚体.与商品化的传统五聚体相比,我们自制的四聚体具有类似的检出率和低非特异性标记水平.
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