期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称:免疫学杂志
- 主管单位:第三军医大学
- 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号:1000-8861
- 国内刊号:51-1332/R
- 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
HLA-DRB1基因分型新方法的建立
刘本荣;熊龙根;田朝伟;钟赟;区文超;李爱群;刘世明
关键词:HLA-DRB1, SBT, 簇特异引物, 基因分型
摘要:目的 改进以测序为基础(sequencing based typing,SBT)的HLA-DRB1基因分型方法,从而降低其分型成本和工作量.方法 根据序列比对结果将DRB1基因分为6个簇(cluster),并设计6对簇特异引物(cluster specific primer,CSP),依据其对应的等位基因簇在人群中的频率高低,利用巢式PCR和CSPs渐进式地扩增,PCR产物纯化后进行测序分型.我们将此方法命名为以频率为基础的CSP-SBT法(Frequency based-CSP-SBT.FB-CSP-SBT)结果用FB-CSP-SBT法对224个中国南方汉族冠心病患者临床样本进行HLA-DRB1等位基因分型.总共鉴定出31个等位基因型,覆盖了所有的HLA-DRBt等位基因谱系.其中,4个在人群中频率高的簇依次为DR52(47.99%,包含DRB1*03、DRB1*08、DRB1*11、DRB1*12、DRB1*13和DRB1*14等6个DRB1等位基因谱系)、DR15(19.20%,包括DRB1*15和DRB1*16)、DR79(18.53%,包括DRB1*07和DRB1*09)和DR04(12.72%),占整个人群的98%以上.观察到的杂合性(heterozygosity)为0.9107,与前人报道的HLA-DRB1基因位点的杂合性相似,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P=0.3517).对于每个样本,利用此方法对DRB1基因进行测序分型比传统的SBT至少减少6~8个PCR反应,同时还减少了测序反应的数目.结论 用FB-CSP-SBT法可以准确地对HLA-DRB1基因进行分型,比传统的SBT法减少了工作量并降低了分型成本.
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