期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

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  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2010年第03期

人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

戴楠;曹晓静;杨宇馨;李梦侠;易维今;王东;胡川闽

关键词:人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶, 杂交瘤, 单克隆抗体
摘要:目的 制备人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶(hAPE1)单克隆抗体(mAb)并对其生物学特性进行鉴定.方法 以hAPEI融合蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用细胞融合、克隆化技术和间接ELISA法获得并筛选针对hAPE1的杂交瘤细胞,以体内诱生法产生腹水,并用Protein G柱亲和纯化得到hAPE1 mAb.采用秋水仙素阻断法、Western blot和间接ELISA法鉴定mAb的染色体核型、特异性、种属交叉反应、亚类、效价和亲和力,并应用于免疫荧光、免疫细胞化学和免疫组化实验中评价mAb性能.结果 获得2株分泌稳定、高特异性的hAPE1 mAb的杂交瘤细胞株2-G1 和4-F6,其效价均超过1:10~7,Ig亚类分别是IgG2b和IgG3,亲和常数分别为1.8×10~(-7)和3.4×10~(-5),与兔、小鼠、大鼠无种属交叉性.2-G1 mAb可应用于免疫细胞化学、免疫细胞荧光和免疫组织化学等实验技术中.,结论 成功获得2株稳定分泌抗hAPE1 mAb的杂交瘤细胞株,产生的mAb具有高纯度、高效价和高特异性的特性,能特异性识别hAPE1天然蛋白和融合蛋白,为开展多种免疫学实验及研究提供必要的物质基础.