期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

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  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2010年第04期

HBV颗粒的纯化及生物学活性鉴定

曾兴光;石统东;韩俊峰;邹丽云;谢谆怡;刘宏利;吴玉章

关键词:乙型肝炎病毒, 不连续蔗糖梯度离心, 纯化, 树鼩肝细胞
摘要:目的 优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法.方法 在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖.PCR荧光定量检测HBV超滤液;电镜观察70 000 g纯化后的HBV超微形态;70 000 g纯化后的HBV颗粒感染树嗣肝细胞,检验70 000 g纯化后的HBV感染活性.结果 100 000 g离心造成大量HBV在离心过程中损失,收获率只有21%,70 000 g离心不仅降低了离心中的病毒损失,而且可有效对HBV和血清进行分离,收获率达到78%以上,较100 000 g还提高3.7倍多.电镜可观察到纯化后病毒液中有大量的病毒颗粒;纯化后的HBV颗粒感染活性良好,可有效感染原代树鼩肝细胞.结论 70 000 g不连续蔗糖梯度离心可有效分离纯化HBV病毒,较100 000 g收获率明显提高,纯化后的HBV不但具有典型的HBV特征,还具有良好的生物学感染活性.