期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
VEGF189基因合成、原核表达及鉴定
陈丹；王宏；朱中松；向军俭；杨琴；赵鑫；邓宁
关键词：VEGF189, SOE PCR, 原核表达
摘要：目的 获得编码VEGF189蛋白的基因,并通过原核表达系统表达VEGF189融合蛋白.方法 应用SOE PCR技术合成VEGF189基因,克隆入pET-32a(+)原核表达载体,转化E coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot检测,表达产物经HisTrapTM HP亲和柱层析纯化,测定蛋白浓度.结果 DNA测序分析表明,合成的VEGF189基因与文献报道相一致.在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的Trx-VEGF189融合蛋白,以包涵体和可溶2种形式存在.表达产物可被兔抗鼠VEGF多抗特异识别.经HisTrapTM HP亲和柱纯化,获得纯度达85%的融合蛋白.结论 成功合成VEGF189基因,并在原核表达系统中获得高表达,为研制高效抗肿瘤的VEGF抗体和疫苗奠定了前期基础.
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