期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
hTNFR(p75)-IgG4融合蛋白在DG44细胞中的表达
张青；张大为；唐静；高闻达；刘全胜
关键词：TNFR, 融合蛋白, 真核表达, DG44细胞
摘要：目的 以pOptivec为载体,以DG44细胞为宿主细胞在贴壁培养条件下表达hTNFR(p75)-IgG4融合蛋白.方法 将重组质粒hTNFR(p75)-IgG4-pOptivec线性化后转染DG44细胞,经筛选得到稳定表达hTNFR(p75)-IgG4融合蛋白的DG44细胞克隆.培养上清经Protein G亲和层析柱纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定.然后对稳定表达目的 蛋白的细胞株进行不同浓度的MTX加压以扩增目的 基因,检测不同MTX加压条件下目的 蛋白的表达量.结果 重组质粒成功转染DG44细胞,经筛选后得到稳定表达目的 蛋白的细胞株.经MTX加压后高表达量达到15 μg/mL培养基左右.结论 hTNFR(p75)-IgG4融合基因片段在DG44细胞中成功表达,且其表达量能够满足实验研究的需要,为下一步实验打下了良好的基础.
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