期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称:免疫学杂志
- 主管单位:第三军医大学
- 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号:1000-8861
- 国内刊号:51-1332/R
- 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
猪链球菌2型疫苗候选分子FBP的表达及免疫学活性研究
刘丽娜;胡福泉;朱军民;赵岩;陈志瑾;唐家琪
关键词:SS2, FBP, 表达, 免疫学活性
摘要:目的 表达SS2纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein,FBP),研究其免疫学活性,探讨其保护活性和作为疫苗候选分子的可能性.方法 用PCR技术从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出fbp基因片段,插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-fbp.该载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后,转化E.coli.Rosetta,IPIG诱导表达,镍离子亲和层析纯化重组蛋白.Western blot证实目的蛋白的分子量和免疫反应原性.重组蛋白免疫小鼠后收集多抗血清,间接ELISA检测其效价.结果 PCR扩增的fbp基因长度约为1700 bp,所构建重组表达载体酶切鉴定无误、测序证实碱基序列100%正确且保持正确读框.IPIG诱导表达,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的10%.亲和层析获得目的蛋白,纯度达80%以上.Western blot检测证实该蛋白能与感染SS2的病人血清发生阳性反应.重组蛋白免疫小鼠后血清效价达1:25600以上.结论 成功构建了表达载体pET30b-fbp,可在工程菌E.coli.Rosetta中表达;表达蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.
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