期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称:免疫学杂志
- 主管单位:第三军医大学
- 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号:1000-8861
- 国内刊号:51-1332/R
- 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
链重叠PCR构建抗HIV免疫毒素及其表达与鉴定
金洪涛;金宁一;李臻;李昌;付延军;王宏
关键词:免疫毒素, 链重叠PCR, 原核表达
摘要:目的 提高抗HIV免疫毒素DT-ScFv原核表达的可溶性与生物活性. 方法 利用链重叠PCR融合的方法,构建了免疫毒素DT-ScFv,二者之间添加了connector序列,免疫毒素基因PCR连接测序以后,将其克隆入pET28a质粒,在BL21(DE3)工程菌中诱导表达,通过免疫印迹鉴定表达的重组蛋白,并通过与表达HIV-1 gp120的靶细胞的间接免疫荧光实验,验证免疫毒素的细胞识别结合能力.结果 本研究成功地构建了免疫毒素DT-ScFv,经原核表达证明目的蛋白以部分可溶的形式存在于表达菌中,添加的connector序列有助于DT-ScFv在细胞中获得正确折叠,重组免疫毒素能与表达gp120的细胞发生特异性的识别结合.结论 利用链重叠PCR融合的方法,添加connector序列,有助于提高免疫毒素表达的可溶性与生物活性.本研究对抗HIV免疫毒素的活性研究与应用研究具有重要的意义.
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