期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
金黄色葡萄球菌肠毒素B的基因克隆与表达
宋云扬；王惠芳；李艳军；高川；张靖；张金平；吴方晖
关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B, 克隆, 多聚酶链试反应, 原核表达
摘要：目的克隆葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,构建其原核表达载体,表达并纯化基因重组SEB,并对其进行活性研究.方法采用PCR技术从金黄色葡萄球菌染色体DNA上扩增得到SEB基因,克隆到原核表达载体pET22b(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,全自动测序仪测序.IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,用HiTrapTM chelating HP柱纯化重组表达的SEB,通过ELISA实验检验重组SEB的抗原性.用脂多糖和放线菌素D致敏小鼠模型检测重组SEB的毒性.结果所克隆的SEB基因核苷酸序列与报道的序列完全相同.表达的SEB在SDS-PAGE图谱的位置与预期相符,得到了SDS-PAGE电泳纯的基因重组SEB.ELISA试验结果表明,纯化的重组SEB与抗野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应.小鼠致死性试验表明,重组SEB与野生型SEB具有相同的毒性.结论在大肠杆菌中成功克隆及表达了金黄色葡萄球菌肠毒素B,为进一步分析SEB分子中相关活性位点及研究SEB发病机制打下了基础.
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