期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

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  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2005年第01期

人OX40-Fc分子的构建、真核表达及活性研究

王艳艳;白云;李茂全;宋建勋;许雪青

关键词:OX40, OX40-Fc, 真核表达, 共刺激分子
摘要:目的构建人OX40-Fc基因的真核表达质粒,并表达有生物学活性的纯化人OX40-Fc融合蛋白.方法从活化的人T细胞cDNA文库中以PCR方法扩增OX40膜外区cDNA编码基因,并导入真核表达载体pcDNA3中.测序证实后,进行酶切并与人IgG1Fc基因一起装入真核表达载体pcDNA3中,采用脂质体法稳定转染COS-7细胞,用夹心ELISA检测其表达情况,经蛋白A亲和纯化,用SDS-PAGE与Western blotting进行鉴定.检测其对活化后Jurkat细胞增殖的抑制活性.结果测序证实构建的OX40膜外区与OX40-Fc cDNA阅读框完整,连接部位序列正确;ELISA证实OX40-Fc蛋白的表达;SDS-PAGE与Westernblotting证实其为OX40-Fc蛋白.增殖实验证明其对活化后的Jurkat细胞有抑制增殖作用.结论成功构建了人OX40-Fc真核表达载体,并使有生物学活性的OX40-Fc融合蛋白在COS-7细胞上获得了稳定表达.为进一步研究该蛋白在自身免疫性疾病治疗中的作用及调节免疫自稳机制中的地位奠定了基础.