期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

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  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2005年第02期

成骨细胞特异性转录因子Cbfa1重组腺病毒的构建、纯化及表达

郭国宁;周跃;张正丰

关键词:核心结合因子, 腺病毒, 基因治疗
摘要:目的构建成骨细胞特异性转录因子Cbfa1重组腺病毒载体,以期用于骨缺损、脊柱融合的体内、外研究.方法以含有全长eDNA的pCMVβ/Cbfa1为模板,PCR扩增Cbfa1,T-A克隆,酶切亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,在BJ5183细菌内和pAdEasy-1同源重组,筛选阳性克隆,酶切、PCR及测序鉴定,线性化后脂质体法转染293T细胞进行包装、扩增,利用报告基因GFP对病毒滴度和感染效率进行监测,CsCl梯度离心纯化病毒.AdEasy1/Cbfa1感染NIH3T3细胞后Western-blotting检测Cbfa1蛋白的表达.结果测序、酶切及PCR证实Cbfal基因重组腺病毒载体构建成功.AdEasyl/Cbfal感染NIH3T3细胞后Western-blotting检测到Cbfa1蛋白的表达.结论成功构建了含有小鼠Cb白l基因的重组腺病毒载体,为下一步研究基因治疗骨缺损、脊柱融合奠定基础.