期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

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  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2005年第03期

HSP70基因的克隆与表达

金欢胜;吴雄飞;金锡御;杨青浩;倪兵

关键词:HSP70, 缺血预适应, 真核表达质粒, 肾脏
摘要:目的构建HSP70真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应中HSP70作用及机制研究.方法用肝癌细胞系HepG2,用RT-PCR方法扩增HSP70cDNA,并利用T载体作为过渡,将HSP70基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中.重组质粒转染NIH3T3细胞,Western-blot法鉴定重组质粒HSP70/pAAV-MCS能在哺乳动物细胞中正确表达.结果 RT-PCR方法正确地扩增出了全长HSP70基因.限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP70基因克隆完全正确.重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECL-Western-blottimg法证实了目的基因能在其中正确表达.结论成功地克隆真核表达重组质粒HSP70/pAAV-MCS,为下一步研究HSP70在肾脏缺血预适应的作用及其机制打下基础.