期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

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  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2004年第01期

肿瘤抗原MAGE-3基因的克隆与原核表达

马加海;隋延仿;叶菁;黄亚渝;陈广生;张秀敏

关键词:基因/MEGE-3, 原核表达, 聚合酶链式反应
摘要:目的克隆肿瘤抗原MAGE-3基因3'端657 bp片段,对其编码的蛋白羧基端97~314aa进行原核表达.方法从含人MAGE-3基因全长cDNA的pUC19/MAGE-3质粒中经聚合酶链式反应(PCR)扩增3'端657 bp片段,并克隆入pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX/MAGE-3,对含有该质粒的大肠杆菌DH5α进行诱导表达.结果从pUC19/MAGE-3重组质粒中扩增获得一条约660 bp的条带,测序结果表明与GenBank公布的MAGE-3序列一致,成功地构建了pGEX/MAGE-3原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌DH5α经异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后表达Mr为54 000 的谷胱甘肽巯基转移酶 (Glutathione S-transferse,GST)融合蛋白.表达的融合蛋白约占菌体蛋白总量的28%.结论成功地构建了pGEX/MAGE-3原核表达质粒,获得了MAGE-3蛋白羧基端97~314aa融合蛋白,为该蛋白应用于肿瘤免疫治疗奠定了基础.