期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办,公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来,先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊,并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘(AJ)收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。                

首页>免疫学杂志
  • 杂志名称:免疫学杂志
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学,中国免疫学会
  • 国际刊号:1000-8861
  • 国内刊号:51-1332/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科协优秀期刊三等奖期刊收录:
免疫学杂志2004年第02期

MAGE-n的原核表达与分离纯化

黄亚渝;隋延仿;叶菁;董海龙;陈广生;张秀敏

关键词:黑色素瘤抗原-n, 原核表达, 纯化, 重组蛋白
摘要:目的构建MAGE-n的原核表达质粒,在大肠杆菌中进行表达,并通过谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferse,GST)纯化系统进行分离纯化.方法用ANTHEPROT V5.0软件预测MAGE-n的生物学特性,从中选择抗原性及特异性较强的一段.利用PCR方法扩增MAGE-n基因片段,连入原核表达载体pGEX-4T-1,构建MAGE-n的原核表达质粒pGEX-MAGE-n并测序.将该质粒转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化.结果成功地扩增了MAGE-n基因片段,测序结果表明与GenBank公布的序列一致,成功地构建了pGEX-MAGE-n原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌经异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后表达一Mr约为43 000的蛋白,经GST融合蛋白纯化系统纯化,得到了MAGE-n的重组蛋白.结论首次获得了新的肿瘤抗原MAGE-n的重组蛋白,并进行分离纯化,为进一步研究MAGE-n抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础.