期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
粉尘螨Ⅰ类抗原cDNA的克隆表达和初步鉴定
杨庆贵；李朝品
关键词：粉尘螨, 抗原, cDNA, 基因重组, 原核表达
摘要：目的构建粉尘螨Ⅰ类抗原(Der f1 )cDNA基因的重组表达质粒,并于E.coli表达.方法用BamHⅠ和SacⅠ从重组质粒pMD-18T-Der f1上切下Der f1基因,插入表达载体pET32a(+)质粒,转化大肠杆菌BL21,在氨苄青霉素阳性的LB平板上筛选阳性重组子,并经双酶切及PCR扩增鉴定.重组质粒pET32a(+)-Der f1转化大肠杆菌,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳和薄层凝胶扫描定量分析.结果对重组质粒进行酶切和PCR鉴定,与预期结果相符,证明已成功构建携带Der f1基因的重组原核表达质粒pET32a(+)-Der f1.核酸序列测定及同源性分析证实所构建的原核表达质粒pET32a(+)-Der f1中所含的Der f1基因与GenBank中的Der f1序列同源性达到99.5%.Der f1基因在大肠杆菌诱导表达后获得Mr约45 000的蛋白,蛋白含量占全菌体蛋白含量的15%.结论成功构建了粉尘螨Ⅰ类抗原cDNA基因的重组表达质粒pET32a(+)-Der f1,并在大肠杆菌中获得高效表达,为获得重组纯化Der f1变应原并用于尘螨变应性疾病的诊治奠定基础.
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