期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
超抗原SEA的基因克隆、原核表达与鉴定
叶菁；隋延仿；李增山；陈广生；张秀敏；曹云新
关键词：葡萄球菌肠毒素A, 超抗原, 原核表达, PCR
摘要：目的构建pRSET-SEA重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达超抗原葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA),进行分离、纯化及western blot鉴定.方法采用PCR技术,从产SEA的葡萄球菌标准菌株FRI 100基因组DNA中获得SEA全长序列,克隆入pUC19中,进行测序,构建pRSET-SEA表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS.通过异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,分离、纯化及western blot鉴定.结果 PCR获得超抗原SEA基因片段,DNA测序结果与文献报道一致;构建了pRSET-SEA表达质粒,并成功地诱导表达出32000 u的蛋白;Western blot鉴定所得蛋白能够与SEA单克隆抗体特异性结合.结论本研究成功地克隆了SEA全长,并进行了原核表达和分离、纯化,获得了SEA蛋白.
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