期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
人N端脂多糖结合蛋白基因在sf21昆虫细胞中的表达
王晓东；刘友生；葛晓冬；张杰；高波；薛沿宁
关键词：N端脂多糖结合蛋白, 杆状病毒, 昆虫细胞, 基因表达
摘要：目的表达重组人N端脂多糖结合蛋白(truncated lipopolysaccharide binding protein,tLBP).方法通过病毒鉴定、SDS-PAGE、western blot、毛细管电泳、体外结合实验、细胞活性实验对重组病毒及重组蛋白tLBP的分子量、纯度和生物学活性进行分析.结果重组病毒空斑分析确定MOI(multiplicity of infection)为8～10,SDS-PAGE显示感染时间65～72 h为佳表达条件;凝胶扫描显示特异表达蛋白占总产物的9.8%,纯化蛋白的分子量约27 000 u,纯度达95%以上;毛细管电泳显示表达产物呈单一峰型;Lowry法测定约1 L上清液可获9 mg 纯化蛋白;Western blot间接显示表达产物反应带与预期值相符;酶联体外结合实验证实该蛋白可特异结合LPS.应用U937细胞,经LPS(1 ng/mL)刺激与LPS(1 ng/mL)刺激加纯化蛋白(1 μg/mL)对比观察发现,加入纯化蛋白后不同时相点TNF-α含量均有所下降.结论人N端脂多糖结合蛋白在sf21昆虫细胞中获得高效表达,并观察到它在体外具有结合或中和内毒素的活性作用.
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