期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第三军医大学主办，公开发行的专业性学术期刊。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊，并被美国化学文摘(CA)、俄罗斯文摘（AJ）收录。适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。
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首页>免疫学杂志
- 杂志名称：免疫学杂志
- 主管单位：第三军医大学
- 主办单位：第三军医大学,中国免疫学会
- 国际刊号：1000-8861
- 国内刊号：51-1332/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国科协优秀期刊三等奖期刊收录：
抗HIV-1 gp120单链抗体基因的克隆及序列测定
王宏伟；金宁一；许崇波；赵宝华；殷震
关键词：人免疫缺陷病毒, 外膜蛋白, 单链抗体
摘要：人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)的外膜蛋白gp120在病毒的感染侵入过程中发挥重要的功能[1]。gp120的单克隆抗体在HIV-1感染的诊断和治疗中起着十分重要的作用[2],但鼠源性抗体因在人体内可产生较强的免疫原性，因此限制了它的应用。利用基因工程手段制备单链抗体ScFv可以克服鼠源单抗的这一缺点，又可进行大规模表达，因此具有重要的临床意义。本实验分离制备抗HIV-1 gp120的单链抗体基因，为今后的进一步应用打下了基础。1 材料与方法[3]1.1 材料 杂交瘤细胞株102,分泌抗HIV-1外膜蛋白gp120的单克隆抗体，由本室制备保存；各种内切酶及修饰酶均购自大连宝生物公司；RNA regents total RNA isolationsystem,polyA tract mRNA isolation system IV wizard PCRpreps DNA purification system,mouse ScFv module recom-binant phage antibody system分别购自Promage公司和pharmacia公司。1.2 方法1.2.1 杂交瘤细胞总RNA的提取：培养单克隆抗体杂交瘤细胞株102至佳生长状态，计算细胞总量大约为2×107～3×107。收集细胞，在无RNA酶环境下分别按RNA gentstotal RNA isolation system和polyA tract mRNA isolationsystemⅣ提供的方法提取细胞总RNA和分离纯化mRNA。1.2.2 cDNA第一条链的合成：将提取到的mRNA按mouse ScFv module recombinant phage antibody system提供的方法，在反转录酶的作用下合成cDNA。
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